Оптимизация криоконсервирования
микроводорослей Dunaliella salina
Чернобай Н.А., Кадникова Н.Г.
Институт криобиологии и криомедицины НАНУ, Харьков, Украина
e-mail: nadiiachernobai@gmail.com

Optimization of cryopreservation of
microalgae Dunaliella salina
Chernobai N.A., Kadnikova N.G.
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the NASU, Kharkov, Ukraine
e-mail: nadiiachernobai@gmail.com

Annotation. The result of cryopreservation depends on many factors. One of them is the initial cell concentration in culture. The obtained results showed that the preservation of cells depends not only on the initial concentration, but also on the composition of the nutrient medium and the final cooling temperature.

Влияние антропогенного и стрессовых абиотических факторов является угрозой сохранения многих видов растений, в том числе и микроводорослей. 
Известно, что в процессе криоконсервирования эукариотических клеток одним из факторов повышения выживаемости после замораживания-отогрева является исходная плотность клеток в суспензии. Однако подобные исследования на клетках микроводорослей практически отсутствуют. 
Нами было изучено влияние исходной  концентрации клеток D. salina, выращенных на питательных средах Ramaraj и Артари,  на их сохранность после замораживания до -10, -40 и -196°С со скоростью охлаждения 1°С/минуту и последующего отогрева. 
В работе исследовалось две концентрации: I – получена в процессе естественного роста (×106 кл/мл); II – после центрифугирования суспензий (×107 кл/мл). Для получения обоих концентраций использовалась культура в стационарной фазе роста, где достигался естественный максимум количества клеток на единицу объема (кл/мл).
Так, повышение исходной плотности клеток в суспензии, выращенной на среде Артари, привело к увеличению концентрации после отогрева. Полученные значения достоверно не отличались от контрольных (охлаждение до -10 и -196°С) или  были близки к ним (охлаждение до -40°С). В культуре, выращенной на среде Ramaraj, подобной тенденции не наблюдалось.
Подвижность клеток, охлажденных до -10°С, не отличалась от контроля во всех исследованных образцах. При охлаждении до -196°С подвижные клетки после отогрева наблюдались только в культуре с концентрацией II, выращенной на среде Артари.  
Установлено, что увеличение исходной концентрации клеток в культуре микроводорослей повышает их сохранность после замораживания-отогрева. Однако конечный результат зависит не только от концентрации, но и других параметров, в частности, состава питательной среды.